TIN 2는 이중 가닥 원격으로만 DNA 결합 단백질(TRF1 및 TRF2)을 단일 가닥 돌출부 결합 단백질(TPP 1-POT 1)에 연결하는 쉘 레틴 복합체의 중요한 구성 요소입니다. 대부분의 생체 내 TRF1 및 TRF 2는 TIN 2를 포함하지만 TPP 1/POT 1가 없는 복합체에 존재합니다. 그러나 테로만-DNA와의 상호작용 매개변수에서 TRF1-TIN 2 상호작용의 역할은 불분명합니다. 여기에서 우리는 원자력 현미경(AFM), 전반사 형광 현미경(TIRFM) 및 DNA 단면 분석을 사용하여 TRF1-TIN 2 상호 작용 때문에 촉진된 DNA 분자의 구조를 조사했습니다.
TIN 2의 짧은(TIN 2S) 및 긴(TIN 2L) isoform 이 테로만 서열과 길이에 의존하는 방식으로 TRF1 매개변수 DNA 압축(시스 상호작용) 및 DNA-DNA 브리지(트랜스 상호작용)를 촉진합니다. 그것은 그것을 보여줍니다. 짧은 테로만-DNA 기질(6 TTAGGG 반복)의 경우 대부분의 TRF1 매개변수 테로만-DNA-DNA 브리지 이벤트는 1.95초의 수명으로 일시적입니다. 더 긴 DNA 기질(270 TTAGGG 반복)에서 TIN 2는 TRF1과 여러 단백질 복합체를 형성하여 몇 분 동안 지속하는 TRF1 매개변수 DNA-DNA 브리지 이벤트를 안정화합니다. 조절 단백질 Tankyrase 1 및 보조인자 NAD 및 TRF1 + TRF1-TIN 2 매개변수 DNA-DNA 브리지의 사전배양은 유의하게 감소한 반면 TIN 2는 Tankyrase 1의 첨가 시 TRF1-TIN 2 매개변수 DNA-DNA 브리지 분해를 보호했습니다.
우리는 또한 TPP 1가 TRF1-TIN 2L 매개변수 DNA-DNA 다리를 억제한다는 것을 보여주었습니다. 우리의 연구는 텔로미어 단백질 어셈블리가 텔로미어 보호 및 신장에서 명확한 역할을 하는 별도의 하위 복합체 및 전체 보호소 복합체와 함께 이종 분자 모델과 이전 연구 결과를 지원합니다.
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